Описание
ИНФОРМАЦИЯ О ВОЗБУДИТЕЛЕ БОЛЕЗНИ
Фитоплазма пролиферации яблони (Candidatus Phytoplasma mali) и фитоплазма истощения и отмирания груши (Candidatus Phytoplasma pyri) являются возбудителями опасных болезней яблони и груши и наносят серьезный экономический ущерб плодоводству на территории Европы. Фитопатогеы относятся к таксономической группе 16SrX и являются карантинными объектами для Республики Беларусь, стран Евразийского экономического союза и стран, входящих в Европейскую и Средиземноморскую организацию по карантину и защите растений (EPPO A2 list). Экономически наиболее значимыми хозяевами для Candidatus Phytoplasma mali и Candidatus Phytoplasma pyri являются Pyrus spp., Malus spp., Cydonia spp.
ПРИНЦИП МЕТОДА
«ALSENSE Phytoplasma mali/pyri ПЦР-РВ» разработан на основе рекомендаций Европейской и Средиземноморской организации по карантину и защите растений (EPPO) и позволяет детектировать ДНК патогенов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Мишенью для амплификации является участок гена 16S рибосомной РНК фитоплазм группы 16SrX. Внутренний контроль (ВКО) разработан на основе последовательностей генов 18S рибосомной РНК яблони и груши. Зонд TaqMan® к участку генома Candidatus Phytoplasma mali и Candidatus Phytoplasma pyri несет на 5’-конце метку-краситель FAM. ВКО-специфичный зонд мечен флуорофором HEX, что позволяет пользователю валидировать этап экстракции ДНК из растений.
РЕКОМЕНДАЦИИ К ОТБОРУ ОБРАЗЦОВ
«ALSENSE Phytoplasma mali/pyri ПЦР-РВ» валидирован для одновременного обнаружения Candidatus Phytoplasma mali и Candidatus Phytoplasma pyri и растительной ДНК с помощью ПЦР в режиме реального времени. Для предварительной экстракции ДНК рекомендуется использовать образцы побегов, черешков и срединных жилок листьев с симптомами болезни. Оптимально использование свежих образцов растительной ткани, однако допустимо их хранение при температуре от минус 20 до минус 80 °C.