Набор реагентов «ALVETPREP»
Cостав набора реагентов «ALVETPREP» для экстракции ДНК/РНК в пробирках и планшетах (кат. № AL-PREP2V-96, на 96 определений).
Реактив | Объем, мл | Количество |
Магнитный сорбент | 1,1 мл | 1 пробирка |
Буфер ALVETPREP лизирующий | 44 мл | 1 флакон |
Буфер ALVETPREP промывочный | 40 мл | 2 флакона |
Буфер ALVETPREP элюирующий | 12 мл | 1 флакон |
Cостав набора реагентов «ALVETPREP» для автоматической экстракции ДНК/РНК (кат. № AL-PREP5V-96, на 96 определений).
Буфер ALVETPREP лизирующий | 96 × 0,4 мл | 1 планшет |
Буфер ALVETPREP промывочный | 96 × 0,7 мл | 1 планшет |
Буфер ALVETPREP элюирующий | 96 × 0,1 мл | 1 планшет |
Наконечники для выделения на 96 образцов 1 планшет | на 96 образцов | 1 планшет |
Материалом для проведения процедуры экстракции ДНК/РНК служит биологический материал – образцы смывов с внешних и внутренних поверхностей тары (упаковки) пищевой продукции, контейнеров и самой продукции.
Объем исследуемого образца – 100 мкл.
Набор реагентов «ALVETPREP» (кат. №AL-PREP2V-96, кат. №AL-PREP5V-96) рассчитан на выделение ДНК/РНК из 96 исследуемых образцов.
Общее время проведения процедуры выделения ДНК/РНК из 1 образца ручным способом составляет 40 минут, автоматическим способом из 96 образцов – 37-45 мин.
При осуществлении отбора проб исследуемого материала для проведения процедуры выделения РНК/ДНК рекомендуется использовать набор реагентов для отбора образцов ALVETMUC кат. №AL-MUC-V.
Взятие материала
Материал для выявления возбудителя COVID-19 продуктов питания отбирается в строгом соответствии с межгосударственными стандартами ГОСТ 31904-2012 “Продукты пищевые. Методы отбора проб для микробиологических испытаний”; ГОСТ Р 54354-2011 “Мясо и мясные продукты. Общие требования и методы микробиологического анализа”; ГОСТ ISO 22119-2013 “Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени для определения патогенных микроорганизмов в пищевых продуктах. Общие требования и определения”; ГОСТ Р 51426-99 (ИСО 6887-83) “Микробиология. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Общее руководство по приготовлению разведений для микробиологических исследований”; ГОСТ Р 52833-2007 (ИСО 22174-2005) “Микробиология пищевой продукции и кормов для животных. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения патогенных микроорганизмов. Общие требования и определения”.
Предварительная обработка проб не требуется.
Условия хранения материала:
- при температуре от 2 °С до 8 °С – в течение 48 ч;
- при температуре минус 20 °С – в течение 1 недели;
- при температуре минус 70 °С – длительно.
Допускается однократное замораживание/оттаивание материала.
В основе действия набора реагентов «ALVETPREP» (кат. №AL-PREP2V-96, кат. №AL-PREP5V-96) лежит метод, основанный на обратимом связывании молекул нуклеиновых кислот на поверхности частиц магнитного сорбента. Исследуемый образец обрабатывается лизирующим раствором в присутствии частиц магнитного сорбента. В результате происходит деструкция клеточных мембран, вирусных оболочек и других биополимерных комплексов и высвобождение нуклеиновых кислот. Растворенная РНК/ДНК связывается с частицами сорбента, в то время как другие компоненты лизированного биологического материала остаются в растворе и удаляются при осаждении сорбента на магнитном штативе с последующими отмывками сорбента. При добавлении буфера для элюции к магнитному сорбенту происходит элюирование ДНК с поверхности сорбента в раствор, который затем отделяется от частиц сорбента магнитной силой. В результате указанной процедуры получается высокоочищенный препарат ДНК, свободный от ингибиторов реакции амплификации, что обеспечивает высокую аналитическую чувствительность ПЦР-исследования.
Ограничения метода.
Применение набора возможно только персоналом, обученным методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории.