Описание
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для выделения плазмидной ДНК высокой степени очистки из жидких культур грамотрицательных бактерий методом магнитной сорбции. Полученная ДНК пригодна для ПЦР, рестрикции, лигирования, трансформации, секвенирования.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Принцип метода основан на лизисе бактериальных клеток с последующей щелочной денатурацией ДНК. После нейтрализации щелочного раствора, кольцевая молекула ДНК восстанавливает исходную структуру, тогда как геномная ДНК регибридизуется случайным образом, образуя крупные агрегаты, выпадающие в осадок вместе с белками. Далее, в присутствии хаотропных веществ плазмидная ДНК обратимо связывается с поверхностью магнитных частиц, после чего отмывается от возможных загрязнителей и элюируется в низкосолевом буфере. Обработка RNAse позволяет избавиться от РНК-загрязнения в образцах плазмидной ДНК.
ПРЕИМУЩЕСТВА
- полное удаление клеточных компонентов;
- быстрота и экономичность: время выделения и очистки — 30 минут;
- выход плазмидной ДНК до 20 мкг;
- эффективность выделения более 85%;
- объём элюируемой плазмидной ДНК 30 — 100 мкл;
- безопасность: не используются хлороформ и фенол;
- гарантийный срок – 2 года.
