Описание
НАЗНАЧЕНИЕ
ДНК-полимераза «ALZYME HSTaq» с «горячим стартом» предназначена для синтеза молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) путём комплементарного копирования родительских цепей ДНК. Область применения включает в себя:
- проведение классической ПЦР;
- проведение ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) с зондами TaqMan, интеркалирующими красителями;
- амплификация фрагментов для ТА-клонирования;
- включение модифицированных нуклеотидов в ДНК.
Технология «Hot Start» обеспечивает отсутствие активности фермента в условиях смешивания ПЦР смеси и активацию его после начальной стадии денатурации.
ХАРАКТЕРИСТИКА
«ALZYME HSTaq» — рекомбинантный термостабильный фермент, катализирующий 5′ → 3′ синтез ДНК на основе одноцепочечной матрицы в присутствии дНТФ и праймеров. Обладает 5′ → 3′ экзонуклеазной активностью, но не проявляет корректирующей активности. «ALZYME HSTaq» позволяет эффективно амплифицировать фрагменты ДНК до 5000 п.н. Специфические мутации обеспечивают устойчивость фермента к некоторым ингибиторам, содержащимся в крови, почве, растительной ткани и др. «ALZYME HSTaq» имеет дезоксинуклеотидил трансферазную активность, благодаря чему значительная часть амплифицированных молекул ДНК несёт на 3′-концах выступающие дезоксиаденозиновые остатки (dA). Концентрация фермента составляет 5 ед. активности/мкл.
Фермент получен из рекомбинантного штамма Е. coli, несущего модифицированный ген Taq-полимеразы. Буфер «ALZYME Taq BM» обеспечивает оптимальные условия для работы ДНК-полимеразы. Конечная концентрация MgCl2 в реакционной смеси — 2,5 мМ. Буфер «ALZYME Taq BM free» не содержит ионов магния, что позволяет оптимизировать условия проведения ПЦР с индивидуальным значением концентрации ионов магния.
