Описание
НАЗНАЧЕНИЕ
Контаминация лекарственных препаратов пирогенными веществами является серьезной угрозой для здоровья пациентов и может приводить к развитию лихорадки и, в конечном итоге, вызвать шок и смерть. Тест активации моноцитов (МАТ) – это новый метод определения полного спектра пирогенных веществ, включая бактериальные эндотоксины и пирогены неэндотоксиновой природы (пептидокгликаны, дрожжи, грибы, вирусы). Тест является полной заменой анализа на пирогенность, проводимого на кроликах, и позволяет отказаться от использования животных.
Набор реагентов «ALPYR MAT» предназначен для определения содержания пирогенных веществ в лекарственных препаратах, активных фармацевтических субстанциях и изделиях медицинского назначения с помощью теста активации моноцитов количественным, полуколичественным методами и методом сравнительного испытания с контрольной серией, утвержденной в качестве стандартной. Набор реагентов позволяет с высокой чувствительностью и точностью выявить эндотоксины, не используя при этом животных.
Набор реагентов «ALPYR MAT» включает в себя следующие компоненты:
| Наименование компонента | Количество в наборе | Условия хранения |
| Клетки МАТ (криоконсервированные моноциты периферической крови, 10 млн. клеток/мл) | 1x1 мл | -80 °C |
| Добавка к культуральной среде FBS (фетальная бычья сыворотка с ультранизким содержанием эндотоксина) | 1x3 мл | -20 °C |
| Cреда RPMI (содержит L-глутамин, стерильная) | 1x50 мл | 2-8 °C |
| Стандарт эндотоксина (липополисахарид E.Coli, 2000 МЕ/мл) | 1x50 мкл | -20 °C |
| Неэндотоксиновый контроль LTA (липотейхоевая кислота, 2 мг/мл) | 1x50 мкл | -20 °C |
| Неэндотоксиновый контроль HKSA (термоинактивированный золотистый стафилококк, 1010 HKSA/мл) | 1x20 мкл | -20 °C |
| ИФА-набор для определения интерлейкина-6 (набор реагентов для определения интерлейкина-6 методом ИФА, диапазон определения 10-3160 пг/мл) | 1 шт | 2-8 °C |
| Планшет стерильный плоскодонный 96-ти луночный | 1 шт | 2-30 °C |
ПРИНЦИП МЕТОДА
В основе метода лежит способность клеток крови моноцитов образовывать в присутствии пирогенных веществ природный медиатор воспаления – интерлейкин-6. Анализ проводится в два этапа. На первом этапе моноциты инкубируют совместно с испытуемым образцом в течение суток. При наличии в исследуемой пробе пирогенных веществ моноциты продуцируют цитокины (в том числе интерлейкин-6). На втором этапе количество выделившегося интерлейкина-6 определяют с помощью иммуноферментного анализа (ИФА). Калибровочную кривую строят с помощью растворов стандарта эндотоксина. Содержание интерлейкина-6 в клеточном супернатанте прямо пропорционально количеству пирогенов в испытуемых образцах.
АНАЛИЗИРУЕМЫЕ СУБСТАНЦИИ
- лекарственные препараты;
- активные фармацевтические субстанции;
- смывы с изделий медицинского назначения;
- биотехнологическая продукция;
- продукция клеточной терапии;
- иммунобиологические препараты – вакцины, сыворотки, альбумины.
ХАРАКТЕРИСТИКИ
- высокая чувствительность набора — до 0,015 ЭЕЭ/мл;
- выявление полного спектра пирогенных веществ;
- не требует использования животных;
- международный стандарт бактериального эндотоксина (ЛПС грамотрицательных бактерий) и неэндотоксиновые контрольные образцы (липотейхоевая кислота и термоинактивированный золотистый стафилококк) входят в состав набора;
- температура хранения флакона с моноцитами -80 °С и ниже.
