ПЦР-набор «ALPREP» для выделения ДНК/РНК из биологического материала методом магнитной сорбции

Набор реагентов «ALPREP» предназначен для одновременного выделения ДНК и РНК из биологического материала ручным или автоматическим методом для последующего анализа получаемого препарата ДНК/РНК с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) и полимеразной цепной реакции с этапом обратной транскрипции (ОТ-ПЦР).

Функциональное назначение набора реагентов «ALPREP» состоит в проведении пробоподготовки для последующего анализа биологических образцов, выполняемой в ходе клинической лабораторной диагностики инфекционной патологии человека с помощью ПЦР или ОТ-ПЦР. Набор применяется для получения препарата ДНК/РНК, свободного от ингибиторов обратной транскрипции и ПЦР, что обеспечивает высокие аналитические возможности последующего анализа.

Область применения. Профессиональное применение в научно-исследовательских целях, в специализированных лабораториях учреждений медицины и здравоохранения.

Ограничения метода

Применение набора возможно только персоналом, обученным методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории.

Материалом для проведения процедуры экстракции ДНК/РНК служит биологический материал (клинические образцы), в том числе: мазки, соскобы, мокрота, лейкоцитарная фракция цельной крови, моча (осадок), эякулят, секрет простаты с содержанием клеток от 100 до 10⁶ в образце.

Объем исследуемого образца - 100 мкл.

Набор реагентов «ALPREP», форма выпуска 1 рассчитан на получение препаратов ДНК/РНК из 48 клинических образцов, форма выпуска 2 – из 96 клинических образцов.

Общее время проведения процедуры выделения ДНК/РНК из 1 образца ручным способом составляет 40 минут, автоматическим способом - 35 минут.

Набор реагентов «ALPREP» применяется на преаналитической стадии анализа клинических образцов.

Набор реагентов «ALPREP» обеспечивает выделение ДНК/РНК с чистотой выделения по показателю соотношения А260/А280 не менее 1,7 из биологических образцов.

Эффективность выделения ДНК/РНК составляет от 30 (до 70% - не менее 30 %)

Полученный очищенный препарат ДНК/РНК может быть использован для последующего анализа с помощью ПЦР, ОТ-ПЦР и их вариантах.

В основе действия набора реагентов «ALPREP» лежит метод, основанный на обратимом связывании молекул нуклеиновых кислот на поверхности частиц магнитного сорбента. Исследуемый образец обрабатывается лизирующим раствором в присутствии частиц магнитного сорбента. В результате происходит деструкция клеточных мембран, вирусных оболочек и других биополимерных комплексов и высвобождение нуклеиновых кислот. Растворенная РНК/ДНК связывается с частицами сорбента, в то время как другие компоненты лизированного биологического материала остаются в растворе и удаляются при осаждении сорбента на магнитном штативе с последующими отмывками сорбента. При добавлении буфера для элюции к магнитному сорбенту происходит элюирование ДНК с поверхности сорбента в раствор, который затем отделяется от частиц сорбента магнитной силой. В результате указанной процедуры получается высокоочищенный препарат ДНК, свободный от ингибиторов реакции амплификации, что обеспечивает высокую аналитическую чувствительность ПЦР-исследования.