Набор реагентов «NOVAprep® 16/18 HPV»
Во время проведения ПЦР при наличии генетического материала возбудителя папиломавирусной инфекции фрагмент ДНК многократно амплифицируется. Детекция продуктов амплификации осуществляется во время анализа. Для этого в состав реакционной смеси, наряду с праймерами и другими компонентами реакции, добавлены специальные флуоресцентные метки (зонды). ДНК-зонд несет флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. При образовании специфичного продукта ДНК-зонд разрушается, действие гасителя на флуоресцентную метку прекращается, что ведёт к возрастанию уровня флуоресценции, который детектируется амплификатором.
В состав реакционной смеси входят олигонуклеотиды и зонды для одновременной амплификации и детекции участков РНК геномов вирусов и гена РНКазы P геномной ДНК человека (эндогенный внутренний контроль). Использование эндогенного ВКО позволяет:
- оценить правильность взятия биоматериала, его транспортировки и хранения;
- контролировать эффективность выделения нуклеиновых кислот и этапов ПЦР-исследования, отсутствие ингибирования реакции.
Результаты амплификации регистрируются по следующим каналам флуоресцентной детекции (таблица 1):
Таблица 1 – Каналы детекции продуктов амплификации:
FAM | HEX | ROX |
ВПЧ 16 тип | ген РНКазы Р человека | ВПЧ 18 тип |
Набор реагентов «NOVAprep® 16/18 HPV» (на 100 образцов):
- Буфер реакционный – 1,5 мл × 1 пробирка;
- Ферментная смесь – 0,12 мл × 1 пробирка;
- ПКО – 0,1 мл × 1 пробирка;
- ОКО – 0,5 мл × 1 пробирка.